Увага! Виконання правил підготовки до лабораторних досліджень впливає на якість результатів, тому необхідно точно дотримуватися техніки підготовки.

Підготовка до здачі аналізу на реакцію Вассермана:

1. Кров здається на голодний шлунок (останній прийом їжі не раніше, ніж за 8 годин до забору крові).
2. За добу до дослідження виключіть спиртне, обмежте фізичні навантаження і жирне/смажене в раціоні харчування.
3. За пару годин до аналізу утримайтеся від куріння тютюнових виробів.
4. За півгодини до забору крові постарайтеся максимально розслабитися.

Інтерпретація результатів

Інтерпретація результатів реакції Вассермана:

Негативний результат («–»): антитіла до збудника сифілісу не виявлені.

Сумнівний ( » + « ) і слабопозитивний ( » ++ » ) результат: можливі і при відсутності зараження сифілісом. Наприклад, у деяких вагітних виявляється помилкова слабопозитивна реакція.

Різко позитивний ( » + + + » ) результат: виявлені антитіла до збудника сифілісу.

Можливі також хибнопозитивні результати при:

• системний червоний вовчак;
• тиреоїдиті;
• атипової пневмонії;
• лепра;
• малярія;
• ВІЛ;
• вживанні наркотиків внутрішньовенно.

Реакция связывания комплемента (РСК) (РВ, реакция Вассермана) с кадиолипиновым и трепонемным антигеном:

RW относится к группе реакций связывания комплемента (РСК) и основывается на способности сыворотки крови больного сифилисом образовывать комплекс с соответствующими антигенами. Современные методики РСК, применяемые для диагностики сифилиса, значительно отличаются по своим антигенам от классической реакции Вассермана, однако, термин «реакция Вассермана» за ними традиционно сохраняется.

В крови заразившегося человека появляются антитела, выработанные иммунной системой. В возбудителе заболевания — бледной трепонеме (Treponema pallidum), содержится антиген кардиолипин, который вызывает выработку антител, определяемых с помощью RW. Положительная реакция Вассермана как раз и свидетельствует о присутствии таких антител в крови человека и на этом основании делается вывод о наличии заболевания.

Сифилис.

Подозрение на сифилис у людей, находящихся в контакте с больными сифилисом.

Беременность.

Наркотическая зависимость.

Прерывание беременности.

Лихорадка, сопровождающаяся увеличением регионарных

Первичное посещение поликлиники.

Поступление в стационар на лечение>/p>.

Лечение в психиатрическом или неврологическом стационаре.

Донорство крови, тканей, спермы, других секретов организма.

Работа в сфере услуг, торговли, медицинского обслуживания, социальной и образовательной сферах

За 1—2 суток до сдачи анализа следует прекратить употребление спиртных напитков. Также не рекомендуется есть жирную пищу — она может исказить результат. В период подготовки к анализу следует воздержаться от приема препаратов наперстянки

Кровь на RW сдается только натощак. Крайний прием пищи должен быть не позднее 6 часов до сдачи анализа.

Анализ крови на RW на Варшавском шоссе 89 | «Андреевские больницы

Реакция Вассермана – лабораторное исследование крови, позволяющее выявить бледную трепонему – возбудителя сифилиса. Анализ проводится для пациентов любого пола и возраста.

Разновидности исследования

Анализ крови на сифилис по Вассерману относится к классическим методам диагностики. При наличии бледной трепонемы развивается реакция образования антител, и по результатам анализа подтверждается или опровергается наличие заболевания.

Результаты оцениваются как отрицательные, сомнительные, слабоположительные, положительные и резкоположительные. Низкая специфичность антигена при этом анализе может стать причиной ложноположительного результата RW анализа крови.

Вероятность получения ложных данных повышается при проведении анализа крови на RW при беременности, аллергических реакциях, заболеваниях крови и иммунной системы, онкологических состояниях. При сомнительных результатах анализа рекомендовано повторное проведение исследования, при необходимости – более современными методами ПЦР и ИФА.

Область применения

Анализ крови на RW является обязательным этапом планового обследования при беременности и подготовке к плановой операции, при профессиональной занятости в медицинской сфере и пищевой промышленности, для лиц, работающих в салонах красоты, и доноров.

Остальные категории населения имеют право обращаться за диагностикой сифилиса при подозрении на контакт с инфицированным лицом, после стоматологического лечения и при других обстоятельствах, способных приводить к заражению.

Противопоказания к исследованию

Противопоказаний к диагностике по методу Вассермана не существует.

Подготовка к исследованию

Специальных мер подготовки нет, но накануне сдачи крови рекомендуется исключить тяжелую пищу и алкоголь и избегать чрезмерных нагрузок. Сдача крови проводится на голодный желудок.

Экспресс-диагностика сифилиса · Клиника «Унилаб»

В Центре молекулярной диагностики «УниЛаб» проводится экспресс-диагностика на наличие сифилиса. Исследования проводятся с помощью теста RPR (Rapid Plasma Reagin — антикардиолипинового теста) — современного аналога реакции Вассермана (RW). Сегодня он является одним из лучших вариантов скринингового исследования для обнаружения или исключения сифилиса на всех стадиях.

Об опасности заболевания

Сифилис — это общее инфекционное заболевание, вызываемое бледной трепонемой. Без лечения оно склонно к хроническому течению, рецидивам и способно поражать все органы и системы. Источником сифилиса служит больной человек. Существуют прямой и непрямой пути заражения. Прямой — при половых контактах, поцелуях, при переливании зараженной крови, во время хирургических вмешательств, заражение плода от инфицированной матери или при кормлении ребенка грудью. Непрямой путь заражения — через предметы, контактирующие с сифилисной инфекцией: стоматологические инструменты, зубные щетки, полотенца, мочалки, клизмы, музыкальные инструменты и т.п.

Когда показано сдавать тест RPR?

• Первичное обследование при подозрении на сифилис (с подтверждением положительных реакций в любом трепонемном тесте).
• Диагностика скрытого сифилиса (с подтверждением положительных реакций в двух трепонемных тестах).
• Обследование доноров (в сочетании с трепонемным тестом).
• Обследование до и во время беременности.
• Скрининговое обследование.

Как записаться на исследование?

Для проведения исследования необходимо сдать кровь из вены в любое удобное для Вас время работы лаборатории, без предварительной записи.

Как подготовиться к исследованию?

Сдавать кровь необходимо натощак. Забор крови проводится с 7.30 до 19.00 с понедельника по пятницу, с 9.00 до 14.00 в субботу.

Подробнее: Сроки доставки биологического материала
Подробнее: Подготовка к лабораторным исследованиям

Как скоро можно получить результаты?

На следующий день.

Куда отправиться с результатами анализов?

При положительном результате анализа — к врачу-венерологу.

Тест Вассермана — обзор

3 Краткий обзор нейросифилиса

Хотя остаются разногласия, похоже, что сифилис был завезен в Европу Христофором Колумбом и его командой в 1493 году. болезнь (Hayden, 2003). Первая крупная европейская эпидемия произошла среди солдат французской армии Карла VIII во время его вторжения в Неаполь в 1495 году. Заболевание впоследствии быстро распространилось по цивилизованному миру и оставалось распространенным в течение следующих четырех столетий (Frith, 2012). Можно сказать, что это было особенно заметно в Париже в конце 1800-х годов. Жан Альфред Фурнье, видный парижский дерматолог / сифилолог, подсчитал, что в то время «от 13 до 15 процентов мужского населения Парижа (около 125 000 человек) были инфицированы» (Corbin, 1990, стр. 264). Однако наука вскоре начала влиять на это. В 1905 году Фриц Шаудинн и Эрих Хоффманн в Берлине определили возбудитель болезни Treponema pallidum . В следующем году Август фон Вассерман разработал названный в его честь тест на фиксацию комплемента, который позволил идентифицировать инфекцию в образце сыворотки.В 1909 году Пол Эрлих (со своим коллегой Сахачиро Хата) также в Берлине обнаружили, что арсфенамин эффективно убивает T. pallidum , а сальварсан (торговая марка) был выпущен для лечения сифилиса в 1910 году. когда Александр Флеминг открыл пенициллин, и в 1943 году Махони, Арнольд и Харрис успешно вылечили четырех пациентов с сифилисом. За исключением ситуаций, когда аллергия на пенициллин препятствует его применению, в настоящее время больше ничего не доказано. Несмотря на большое историческое значение, тест Вассермана в настоящее время заменен (возможно, модифицирован для большей точности) другими нетрепонемными серологическими реакциями, RPR (быстрое реагирование плазмы) и VDRL (лаборатория исследования венерических заболеваний). В настоящее время они дополняются более новыми и более специфическими анализами, которые определяют присутствие самого организма (абсорбция флуоресцентных трепонемных антител, FTA-ABS; анализ агглютинации частиц T. pallidum , TPPA; и иммуноферментный анализ сифилиса, EIA).Здесь следует отметить, что нетрепонемные тесты могут вернуться к неактивным позже в ходе болезни, как, по-видимому, произошло в случае с Делиусом.

Заболевание обычно делится на раннюю и позднюю фазы. Ранний сифилис включает первичные, вторичные и ранние латентные формы; поздний (третичный) сифилис может иметь сердечно-сосудистые или гумматозные проявления и, что наиболее актуально в этом контексте, нейросифилис. Первичное поражение представляет собой безболезненный шанкр в месте инокуляции. Это очень заразно, и около 1/3 пациентов, подвергшихся активному поражению, заболевают после инкубационного периода от нескольких до 90 дней, в среднем около 3 недель.Шанкр может, в зависимости от его расположения, остаться незамеченным и самопроизвольно зажить в течение 3–6 недель, независимо от того, лечится он или нет. T. pallidum можно идентифицировать в шанкрах, исследуя материал под микроскопом в темном поле, но, к сожалению, этот организм не может быть культивирован in vitro . Вторичная фаза наступает через несколько недель или месяцев и может включать сыпь, лихорадку, головную боль, недомогание, анорексию и лимфаденопатию. Между прочим, можно показать, что распространение микроорганизма, включая попадание в спинномозговую жидкость (CSF), происходит во время начальной фазы инфекции и, как ясно продемонстрировано в случае Делиуса, может оставаться бессимптомным (т.э., латентный) в течение многих лет. Положительная серология может быть единственной обнаруживаемой аномалией в настоящее время.

Нейросифилис может принимать различные формы и возникать в любое время после первоначального заражения. По оценкам исследований, проведенных в доантибиотическую эру, у 25–35% пациентов с сифилисом разовьется поражение нервной системы. Около 30% будут бессимптомными, у 30% в конечном итоге разовьется спинная мышца (см. Ниже), у 10% будет общий парез, еще у 10% будут менинговаскулярные формы, а у остальных будет множество менее распространенных подтипов.

Ранние формы нейросифилиса включают бессимптомный плеоцитоз или излияние воспалительных клеток в спинномозговой жидкости, обычно менее 100 на мм ³ , повышенный уровень белка до 100 мг / дл и положительный серологический тест, обычно VDRL. Симптоматический менингит на этой стадии обычно возникает в течение первого года после заражения и включает типичные признаки, такие как головная боль, ригидность шеи, лихорадка и сильная менингеальная реакция, включая 200–400 клеток / мм ³ , белок 100–200 мг / мм dl и положительный VDRL. Эта фаза может сопровождаться потерей слуха, а также поражением глаз, обычно задним увеитом. МРТ может показать усиление менингеальной оболочки. Спонтанное разрешение может произойти как после симптоматических, так и бессимптомных менингеальных форм. Менинговаскулярный нейросифилис может развиться от нескольких месяцев до нескольких лет после первоначального инфицирования с поражением менингеальных сосудов, вызывающим инсульт и очаговые неврологические симптомы. ЦСЖ может содержать 10–100 клеток / мм ³ и белок в диапазоне 100–200 мг / дл.VDRL обычно, но не всегда реактивный.

Поздний нейросифилис обычно означает общий парез или, чаще, tabes dorsalis, форму, которую предположительно имел Делиус. Общий парез, иногда в прошлом называемый GPI (общий парез душевнобольных), представляет собой прогрессирующее слабоумное заболевание, обычно начинающееся через 10–25 лет после первичного инфицирования, но может возникнуть уже через 2 года после вакцинации. На ранних стадиях отмечаются забывчивость и изменения личности, сопровождающиеся усилением потери памяти, неадекватностью суждений и психотическими симптомами. В полностью развитой форме может развиться практически любой неврологический признак, включая аномалию зрачков, обычно наблюдаемую в табетической форме. Спинномозговая жидкость почти всегда ненормальна; VDRL в CSF является реактивным практически во всех случаях.

Tabes dorsalis (локомоторная атаксия) имеет самый длительный латентный период, в среднем 20 лет, и характеризуется поражением задних столбов спинного мозга и спинных корешков. Клинически это проявляется сенсорной атаксией и стреляющими болями, парестезиями и желудочными кризами, включая сильную боль в эпигастрии с тошнотой и рвотой (то, что Jelka описал как «приступы желчи»).Характерная аномалия зрачка, маленький зрачок, не реагирующий на свет, но сужающийся из-за аккомодации и конвергенции, известный как зрачок Аргайла Робертсона по имени человека, который впервые описал его, наблюдается примерно у 1/2 пациентов с дорсальной вкладкой и у меньшего процента пациентов. с общим парезом. Обычно считается патогномоничным для нейросифилиса. Другие частые аномалии включают отсутствие рефлексов растяжения мышц в ногах; нарушение чувства вибрации и положения суставов; выраженная несогласованность нижних, а часто и верхних конечностей; и атрофия зрительного нерва с в значительной степени сохраненной когнитивной функцией.CSF может быть нормальным, включая нереактивный VDRL. Специфические трепонемные сывороточные тесты практически всегда являются реактивными. Спинномозговая жидкость FTA-ABS очень чувствительна, но не очень специфична. Таким образом, нереактивное исследование почти во всех случаях исключает диагноз нейросифилиса, но реактивный тест не обязательно подтверждает диагноз.

Здесь можно упомянуть, что Перси Грейнджер, сыгравший такую ​​большую роль в дальнейшей жизни Делиуса, на самом деле был хорошо знаком с сифилисом, хотя сам не страдал.Его отец заразился этой болезнью в результате ряда связанных с алкоголем внебрачных связей вскоре после рождения Перси и передал болезнь своей жене. У обоих родителей в конце концов развился нейросифилис; его отец умер от tabes dorsalis, а его мать, у которой, по всей видимости, развивался общий парез, покончила жизнь самоубийством (O’Shea, 1987).

Краткая история лабораторной диагностики сифилиса

Щелкните здесь, чтобы узнать об увлекательной истории сифилиса и борьбе ученых с этой болезнью.

Начало лабораторной диагностики сифилиса: прямое обнаружение организмов с помощью микроскопии

За 500 лет после того, как сифилис был впервые описан в Европе, не было достигнуто никакого прогресса в специфической лабораторной диагностике. Лишь вскоре после рубежа 20-го века этиологический агент болезни, Treponema pallidum , был впервые обнаружен в пораженных тканях немецким зоологом Фрицем Шаудинном и дерматологом Эрихом Хоффманом.После идентификации T. pallidum ученые знали, на что обращать внимание при разработке тестов, помогающих в диагностике сифилиса. Ниже представлена ​​микрофотография спирохет T. pallidum в инфицированной ткани яичка, окрашенных модифицированным методом окрашивания серебром Штейнера. Вероятно, это не совсем то, что видели Шаудинн и Хоффман, но это хороший пример того, как больная ткань может быть заражена большим количеством спирохет при исследовании под микроскопом.

1906 год стал годом крупного прорыва в лабораторных исследованиях на сифилис, когда американский иммунолог австрийского происхождения Карл Ландштейнер, который произвел фурор в области гематологии всего за несколько лет до этого своим открытием групп крови ABO, вместе со своим дерматологом. его коллега Виктор Муха представил использование темнопольной микроскопии для обнаружения сифилитических трепонем в инфицированных образцах.

Этот новый метод был важным достижением, но в конечном итоге оказалось, что он имеет значительные ограничения. Прямое обнаружение с помощью микроскопии достаточно хорошо работает при первичном сифилисе с чувствительностью примерно 80%, так как большое количество трепонем часто видно в образцах тканей шанкра. Однако чувствительность к темному полю снижается по мере прогрессирования инфекции, а также может уменьшаться, если пациент лечился местными антибиотиками.Кроме того, этот метод микроскопии нельзя использовать для визуализации трепонем в образцах, взятых изо рта, поскольку во рту обитают многие виды непатогенных трепонем, которые морфологически неотличимы от T. pallidum , что приводит к ложноположительным результатам.

Трепонемы также могут наблюдаться в образцах, взятых из поражений слизистой оболочки вне полости рта и больших кондилом (вторичные сифилитические поражения, которые обычно бывают гладкими, влажными и плоскими). Образцы выделений из носа у новорожденных с нюханием (сифилитический ринит), взятые у больных с врожденным сифилисом, часто изобилуют трепонемами, которые также можно легко визуализировать с помощью микроскопа темного поля.Ниже приведена микрофотография, сделанная с использованием метода визуализации в темном поле, демонстрирующая присутствие спирохет T. pallidum . Те, кому интересно, как выглядят эти состояния и поражения, могут пойти в библиотеку изображений общественного здравоохранения CDC и выполнить поиск, используя «сифилис» в качестве ключевого слова.

Чувствительность анализов прямой визуализации во многом зависит от правильного сбора образцов, который включает получение серозного экссудата из поражений, избегая при этом крови или гноя, которые могут быть близко к поражению или даже над ним, с последующим размещением собранных образцов на предметном стекле, которое необходимо исследуют с помощью микроскопа темного поля в течение 20 минут после сбора.В повседневной клинической практике от этого метода в значительной степени отказались из-за необходимости наличия специального микроскопа и подготовленного микроскописта поблизости от места сбора образцов. В результате большинство медицинских учреждений и клинических лабораторий не имеют возможности проводить этот тип тестирования.

Нетрепонемное тестирование

Примерно в то же время в Германии бактериолог Август Пауль фон Вассерманн работал с двумя дерматологами / венерологами, Альбертом Нейссером (в честь которого была названа Neisseria gonorrhoeae) и Карлом Бруком, чтобы разработать первый серологический тест для диагностики сифилиса.В их анализе, опубликованном в 1906 году, использовался метод фиксации комплемента, разработанный бельгийскими учеными Жюлем Борде и Октавом Генгу. (Одно указание на любого, кто может прокомментировать организм, названный в честь Bordet, который растет в культуральной среде, разработанной этими двумя микробиологами.) Присутствие антител, «специфичных» к сифилису, в сыворотках пациентов, метко названных Вассерманом. антитела в то время могут привести к образованию иммунных комплексов и истощению факторов комплемента, в результате чего индикаторные эритроциты останутся нетронутыми (положительная реакция Вассермана.На рисунке ниже показан тест Вассермана и его интерпретация результатов, основанных на наблюдении за эритроцитами.

Вассерманн и его коллеги попробовали несколько различных антигенов для анализа, и экстракт печени сифилитического плода оказался намного более реактивным по сравнению с другими больными тканями обезьяны или человека.При первоначальной оценке анализ был исключительно положительным на сыворотках пациентов с сифилисом, но дальнейшее тестирование большего количества образцов начало выявлять ложноположительные результаты у несифилитических лиц. Только в 1907 году Ландштейнер выяснил ранее неизвестный механизм, лежащий в основе реакции Вассермана, путем идентификации липоидных «аутотоксичных» веществ, с которыми антитела Вассермана образуют иммунные комплексы в присутствии лецитина и холестерина. Идентификация этих веществ в несифилитических тканях, включая сердце, позволяет предположить, что эти антитела, названные Ландштейнером «реагином», неспецифичны для T.паллидум; , анализ для обнаружения этих антител, теперь известных как антифосфолипидные антитела, будет считаться тем, что мы сейчас называем нетрепонемным тестом. Позже было обнаружено, что реагины также образуются в ответ на острые или хронические нетрепонемные заболевания, при которых происходит повреждение тканей.

Биологические ложноположительные результаты нетрепонемных тестов связаны с несколькими несифилитическими состояниями, включая другие инфекции (например, вирус иммунодефицита человека), аутоиммунные расстройства, беременность, иммунизацию, употребление инъекционных наркотиков и пожилой возраст.Несмотря на свои подводные камни, тест Вассермана был одним из первых серологических тестов для диагностики инфекционных заболеваний и основой для последующих нетрепонемных тестов для диагностики сифилиса.

В 1940-х годах основным веществом, используемым в качестве антигена в тесте Вассермана, был дифосфатидилглицерин, называемый кардиолипином, который обычно обнаруживается в нормальных несифилитических тканях, включая сердце. Почему обнаружение антифосфолипидных, нетрепонемных антител может указывать на сифилис, было предметом споров в течение последних 6 десятилетий.Исследование 2018 года с использованием модели инфекции кроликов показало, что T. pallidum сам по себе содержал кардиолипиновый антиген, но со слабой иммуногенностью, в то время как активный T. pallidum индуцировал более высокую продукцию нетрепонемных антител в организме хозяина. Было высказано предположение, что увеличение продукции антифосфолипидных антител является результатом комбинированного воздействия как кардиолипинового антигена T. pallidum , так и поврежденного кардиолипинового антигена хозяйской клетки во время сифилисной инфекции, последний из которых, вероятно, играет основную роль в это индукционный процесс.

Антигены, использованные в более ранних поколениях нетрепонемных анализов, представляли собой неочищенные экстракты пораженных тканей, обработанные с использованием различных методов экстракции, что затрудняло их стандартизацию. В 1941 году Мэри Пэнгборн и др. опубликовал метод выделения кардиолипина и лецитина из говяжьего сердца. Использование комбинации очищенного кардиолипина, лецитина и холестерина в качестве антигена для тестов на нетрепонемные антитела позволило улучшить стандартизацию анализов и улучшить воспроизводимость внутри лабораторий и между лабораториями.В настоящее время синтетический кардиолипин и лецитин используются для приготовления реагентов для нетрепонемных анализов вместо экстрактов из говяжьего сердца.

Другой метод, сыгравший важную роль в разработке нетрепонемных тестов на антитела к сифилису, — это флокуляция, которую предложили немецкие ученые Ханс Закс и Вальтер Георги. Флокуляция происходит, когда антигены, используемые в анализе, образуют комплекс с нетрепонемными антителами в образце пациента, что приводит к слипанию антигенов, которое можно наблюдать визуально (макро- или микроскопически).Нетрепонемные тесты с использованием флокуляции были гораздо менее утомительными, чем тесты, основанные на фиксации комплемента, которые к 1940-м годам устарели. Разработано множество нетрепонемных тестов, основанных на методе флокуляции. Одним из первых поколений тестов на флокуляцию был тест Хана. В этом исследовании, опубликованном в 1922 году, использовался антиген, состоящий из экстракта говяжьего сердца и холестерина, суспендированного в солевом растворе. В 1927 году американский бактериолог / патолог Уильям Огастус Хинтон (который позже стал первым афроамериканским профессором Гарвардского университета) опубликовал улучшенный тест флокуляции, в котором холестеринный антиген экстракта говяжьего сердца был суспендирован в глицериновом солевом растворе вместо обычного. физиологический раствор.Этот новый тест показал повышение чувствительности по сравнению с тестом Хана, и этот метод был принят для рутинного тестирования пациентов в течение многих лет. (Второй аргумент для тех, кто может прокомментировать название питательной среды, которую дочь доктора Хинтона, ветеринар Джейн Хинтон, разработала совместно, работая лаборантом в Гарварде.) Американский бактериолог / патолог Уильям Огастес Хинтон. Источник: https://collections.countway.harvard.edu/onview/items/show/18162

Чувствительность и простота использования тестов флокуляции реактивного типа привели к разработке многих других тестов, основанных на аналогичных принципах.К ним относятся реакция ценового преципитации (PPR), тест на реагин в ненагретой сыворотке (USR), автоматический тест на реагин (ART) и тест на толуидиновый красный в ненагретой сыворотке (TRUST). Тем не менее, в клинических лабораториях и лабораториях общественного здравоохранения по-прежнему обычно выполняются только Тест Лаборатории исследования венерических заболеваний (VDRL) и Экспресс-тест на плазменный реагин (RPR). Прочтите об этих анализах подробно в рамках алгоритмов диагностики сифилиса, обсуждаемых в следующей статье о диагностике сифилиса.

Тестирование трепонемных антител

Идентификационный номер T.pallidum как этиологический агент сифилиса позволил ученым разработать диагностические тесты для определения наличия трепонемных антител. В дополнение к его работе по идентификации липоидных веществ, которые служат антигенами в тесте Вассермана, Ландштейнер и его коллеги также сообщили, что сыворотка больных сифилисом подавляла движения T. pallidum . Это наблюдение легло в основу теста иммобилизации (TPI) T. pallidum , который был введен в 1949 году американскими учеными Манфредом Майером и Робертом Нельсоном.Несмотря на сложные и утомительные процедуры тестирования, TPI стал одним из первых тестов на трепонемные антитела и был принят в качестве подтверждающего теста для образцов, положительных на нетрепонемные тесты.

О флуоресцентном тесте на антитела к сифилису впервые сообщили в 1957 году Дикон, Фальконе и Харрис. В этом тесте сыворотки пациентов инкубировали на предметных стеклах, которые содержали мазки антигена, приготовленные из суспензии инактивированных организмов, с последующей промывкой и окрашиванием антителом, конъюгированным с флуоресцеинизотиоцианатом (FITC).Присутствие трепонемных антител приведет к флуоресценции организма на предметном стекле. Первое поколение теста имело высокий уровень ложноположительных результатов, возможно, из-за перекрестной реактивности с непатогенными видами Treponema . Чтобы снизить уровень ложноположительности, исследователи экспериментировали с дальнейшими разбавлениями образцов в качестве попытки снизить неспецифическую реактивность. Однако этот подход пришелся за счет чувствительности анализа. В 1964 г. было опубликовано Соглашение о свободной торговле с процедурой поглощения (FTA-ABS).Добавление стадии абсорбции, на которой образец предварительно обрабатывали дезинтегрированными ультразвуком непатогенными трепонемами Рейтера, привело к значительному увеличению специфичности при сохранении чувствительности анализа. FTA-ABS все еще проводится в некоторых клинических лабораториях и лабораториях общественного здравоохранения в качестве трепонемного теста, но он может давать различные результаты из-за различий в оборудовании, реагентах и ​​субъективной интерпретации.

Тест на гемагглютинацию Treponema pallidum (TPHA) был представлен в 1966 году Такаюки Томидзава и Шигео Касамацу, которые разработали тест с целью упростить процесс тестирования трепонемных антител.В этом тесте сыворотки пациентов предварительно обрабатывали обычными (несенсибилизированными) эритроцитами барана. Предварительно обработанные сыворотки инкубировали с эритроцитами, сенсибилизированными антигеном, полученным из штамма T. pallidum Nichols. Гемагглютинация показала наличие в образце трепонемных антител. Новое поколение этого теста называется тестом агглютинации частиц T. pallidum (TP-PA). В этом тесте используется тот же антиген, что и TPHA, но вместо красных кровяных телец используются носители желатиновых частиц.

В дополнение к упомянутым выше тестам было разработано множество иммуноферментных анализов (EIA) и хемилюминесцентных иммуноанализов (CIA), которые коммерчески доступны для обнаружения трепонемных антител. Одним из преимуществ EIA и CIA является то, что они могут быть автоматизированы для высокопроизводительного скрининга, сводя к минимуму человеческие ошибки и различия между операторами. Интересно, что использование EIAs и CIAs увеличилось за последние несколько лет из-за принятия алгоритма обратного скрининга на сифилис в клинических лабораториях и лабораториях общественного здравоохранения.Об этом пойдет речь в следующей статье о диагностике сифилиса.

А как насчет молекулярного тестирования на сифилис?

Было разработано и опубликовано множество ПЦР-анализов, но методы не стандартизированы и отсутствуют в продаже. Однако молекулярное тестирование может быть полезно при диагностике врожденного сифилиса, нейросифилиса и раннего первичного сифилиса. Центры по контролю и профилактике заболеваний (CDC) проводят молекулярное обнаружение T. pallidum во многих типах образцов, но поставщики должны сначала проконсультироваться со своим отделом здравоохранения и получить разрешение на отправку образцов в CDC через местный или государственные лаборатории общественного здравоохранения.

В следующей статье этой серии о диагностике сифилиса я расскажу о преимуществах и недостатках нетрепонемных и трепонемных тестов, а также рекомендуемых алгоритмах тестирования.

Утверждения и мнения, выраженные в этой статье, принадлежат автору и не обязательно отражают мнения Департамента общественного здравоохранения и лабораторий общественного здравоохранения округа Лос-Анджелес или Американского общества микробиологов.

100-летие реакции Вассермана-Нейссера-Брука

Август Пауль фон Вассерманн (1866-1925), немецкий бактериолог, вместе с Альбертом Нейссером (1855-1916), немецким дерматологом и венерологом, и Карлом Бруком (1879-1944), немецким дерматологом и венерологом, разработали первый серологический тест для диагностики. сифилиса.Свою первую статью об этом они опубликовали 10 мая 1906 г. (Dtsch Med Wochenschr 1906; 32: 745). Они использовали идею теста фиксации комплемента Жюля Борде (1870-1961) и Октава Генгу (1875-1957), поэтому реакцию Вассермана иногда называют реакцией Борде-Вассермана. Исследование проводилось в Берлинском институте инфекционных заболеваний (Berliner Institut für Infektionskrankheiten) и в отделении дерматологии Бреслау (Вроцлав). Реакция Вассермана использовалась при диагностике сифилиса.Используемый в нем антиген был приготовлен эмпирическим путем. Первоначально так называемые антигены представляли собой экстракты тканей человека или обезьяны, богатые Treponema pallidum. Наиболее активным оказался экстракт печени сифилитического плода. Позже активное вещество, названное кардиолипином, было обнаружено в нормальных несифилитических тканях, включая сердце (обычно сердце крупного рогатого скота). Карл Ландштейнер (1868-1943) идентифицировал антиген, участвующий в реакции Вассермана, как липоидное вещество, которое в конечном итоге было идентифицировано как дифосфатидилглицерин.Антитела Вассермана, вырабатываемые при инфекции сифилиса, реагируют с кардиолипином в присутствии лецитина и холестерина. Реакция антиген-антитело производит иммунные комплексы, что приводит к фиксации комплемента классическим путем; это может быть использовано для определения уровня антител в сыворотке (если <1 мкг / мл). На заключительном этапе в смесь добавляются индикаторные клетки (эритроциты) вместе с субагглютинирующим количеством антител (антиэритроцитарные антитела).Если останется какой-либо комплемент, эти клетки будут лизированы; если он был поглощен иммунными комплексами, количество оставшегося комплемента будет недостаточным для лизиса эритроцитов. В первом эксперименте Вассерманна и др. Реакция была положительной только с сыворотками пациентов с сифилисом, но вскоре было обнаружено, что некоторые другие заболевания дали положительные результаты у несифилитиков. Первые такие случаи были зарегистрированы в 1909 году. С открытием новых и более специфических тестов на сифилис, тесты фиксации комплемента типа Вассерманна постепенно ушли в небытие.Новая эра в венерологии началась с открытия T pallidum Фрицем Шаудинном (1871-1906) и Эрихом Хоффманном (1868-1954) в 1905 году и разработкой серологии сифилиса Вассерманом, Нейссером и Бруком в 1906 году. В настоящее время реакция Вассермана больше не используется, следует подчеркнуть, что это был один из самых первых серодиагностических тестов, когда-либо использовавшихся в медицинской практике. Карл Брук сказал в 1920-х годах: «Эта удачная и уникальная ошибка составила основу очень важного открытия, значение которого было как теоретическим, так и практическим."

Тест Вассермана — wikidoc

Главный редактор: C. Майкл Гибсон, M.S., M.D. [1]

Тест Вассермана — это тест на антитела к сифилису с фиксацией комплемента (система комплемента), названный в честь бактериолога Августа фон Вассерманна.

Метод

Берут образец крови или спинномозговой жидкости и вводят антиген — кардиолипин, выделенный из мышцы или сердца крупного рогатого скота.Сифилис-специфические антитела (реагины) реагируют с липидом — реакция Вассермана антифосфолипидных антител (АРА). Интенсивность реакции (1, 2, 3 или 4) указывает на тяжесть состояния.

Неопределенность

Реакция на самом деле не специфична для сифилиса и вызывает положительную реакцию при других заболеваниях, включая малярию, туберкулез и многие другие болезни. У инфицированного человека может не возникать никакой реакции, а у успешно пролеченного человека может продолжаться реакция (так называемая быстрая или фиксированная реакция Вассермана).

Развитие и доработка

Тест на антитела был разработан Вассерманом и Альбертом Нейссером в Институте инфекционных болезней Роберта Коха в 1906 году. реакция комплемента-фиксации, опубликованная в 1901 г., и положительную реакцию иногда называют реакцией Борде-Ченгу-Вассермана или реакцией Борде-Вассермана.

Тест Вассермана был усовершенствован — тест Кана, тест Колмера — и сегодня он используется редко.Заместительные тесты (тест VDRL, экспресс-реагент для плазмы (тест RPR), первоначально основанный на методах флокуляции (Хинтон)), показали гораздо меньше ложноположительных результатов. Действительно, «биологические ложноположительные результаты» современных тестов обычно указывают на серьезное альтернативное состояние. , часто аутоиммунное заболевание.

Список литературы

1. ↑ Шаблон: WhoNamedIt
2. ↑ А. Вассерман, А. Нейссер и К. Брук. Eine serodiagnostische Reaktion bei Syphilis. Deutsche medicinische Wochenschrift, Берлин, 1906, 32: 745-746.Объявление теста на сифилис.

Внешние ссылки

nl: Wassermannreactie

Шаблон: WS

wassermann_test

Самый быстрый словарь в мире: Vocabulary.com

История сифилиса

История свидетельствует о том, что сифилис — это болезнь древних времен.Заболевание могло быть распространено среди коренных народов Америки до того, как европейцы отправились в Новый Свет и из него.

«Доколумбовая теория»

«Доколумбовая теория» утверждает, что сифилис присутствовал в Европе до того, как европейцы открыли Америку. Болезнь описана Гиппократом в классической Греции в ее венерической / третичной форме.

Есть и другие подозрения на сифилис в Европе до контакта, в том числе в монастыре августинцев 13–14 веков в северо-восточном английском порту Кингстон-апон-Халл.Считается, что морская история этого города с постоянным прибытием моряков из отдаленных мест стала ключевым фактором передачи сифилиса.

«Французская болезнь»

Некоторые историки считают, что болезнь впервые появилась у французских войск, осаждающих Неаполь, а итальянцы назвали ее morbus gallicus («французская болезнь»). С другой стороны, французы предпочитали называть это «неаполитанской болезнью» или болезнью из Неаполя.

Сифилис — «социальная болезнь»

Упоминания об этой болезни присутствуют в истории, и многие известные люди стали жертвами этой болезни.Это было названо социальным злом, и и сифилис, и гонорея были «социальными болезнями», а борьба с ними была направлена ​​на движение за «социальную гигиену». «Социальное зло» означало проституцию.

Начало 1900-х годов

В 1911 году Калифорния стала первым штатом, который потребовал от врачей сообщать о случаях венерических заболеваний, чтобы гарантировать конфиденциальность.

В 1913 году японский ученый Хидейо Ногучи продемонстрировал наличие спирохеты Treponema pallidum в головном мозге пациента с прогрессирующим параличом, доказав, что причиной болезни была Treponema pallidum.Без понимания его причины сифилис до этого времени иногда неправильно диагностировался и часто ошибочно относился к ущербу, нанесенному политическими противниками. Психическое заболевание, вызванное поздней стадией сифилиса, когда-то было одной из наиболее распространенных форм деменции. Это было известно как общий парез душевнобольных.

Кабинет Таскиги

Между 1932–1972 гг. Служба общественного здравоохранения США провела то, что стало известно как «Исследование нелеченного сифилиса у мужчин-негров в Таскиги» (также известное как «Исследование сифилиса Таскиги» или «Эксперимент Таскиги»).Это было клиническое исследование, проведенное в Таскиги.

Около 400 бедных, в основном неграмотных, афроамериканских мужчин, больных сифилисом, систематически и намеренно отказывали в эффективном лечении, чтобы исследователи могли наблюдать естественное развитие болезни при отсутствии лечения. Это неэтичное поведение вызвало серьезные споры и в конечном итоге привело к серьезным изменениям в методах защиты пациентов в клинических исследованиях.

К 1953 году администрация Эйзенхауэра предложила ликвидировать социальных гигиенистов и их программу по венерическим заболеваниям PHS (Служба общественного здравоохранения), поскольку они чувствовали, что их работа в основном сделана.Но сифилис вместе с другими инфекциями, передаваемыми половым путем, такими как гонорея, герпес, хламидиоз и СПИД, вернулся.

История диагноза

Сифилис был впервые эффективно диагностирован с помощью теста в 1906 году. Это называлось тестом Вассермана. Это действительно дало несколько ложноположительных результатов, но было большим достижением в профилактике сифилиса. Позволяя пройти тестирование до появления острых симптомов болезни, этот тест позволил предотвратить передачу сифилиса другим людям.

За ним последовал тест Хинтона, разработанный Уильямом Августом Хинтоном в 1930-х годах. Это было основано на принципе флокуляции и показало меньше ложноположительных реакций, чем тест Вассермана. Оба этих ранних теста были заменены новыми аналитическими методами.

История лечения сифилиса

Ранее сифилис не поддавался лечению и обычно прогрессировал до более поздних стадий. Испанский священник Франсиско Деликадо в 1525 году писал об использовании Guaiacum при лечении сифилиса.

Еще одним распространенным лекарством была ртуть. Отсюда возникла поговорка: «Ночь в объятиях Венеры ведет к жизни на Меркурии». Ртуть принимали перорально, путем инъекции или втирания в кожу. Другой способ — окурить зараженного человека в ящике, наполненном парами ртути, с торчащей головой. Упоминания об использовании ртути при сифилисе восходят к «Канону медицины» (1025 г.) персидского врача Ибн Сины (Авиценны). Джорджио Соммарива из Вероны использовал его для этой цели в 1496 году.

Первым антибиотиком, который использовался для лечения болезни, был мышьякосодержащий препарат сальварсан, разработанный в 1908 году Сахачиро Хата во время работы в лаборатории лауреата Нобелевской премии Пола Эрлиха. Позже он был преобразован в Неосальварсан. Это не было полностью эффективным, особенно на третичных ступенях.

Эти методы лечения окончательно устарели с открытием пенициллина и его повсеместным производством после Второй мировой войны.

Известные люди, инфицированные сифилисом в истории болезни

Ключи: S — подозреваемый случай; † — умер от сифилиса

• Эндре Ади (1877-1919), венгерский поэт †
• Морис Бэрримор (1849–1905) актер †
• Джон Бэтмен (1801–1839), основатель Мельбурна †
• Шарль Бодлер (1821–1867), поэт †
• Карен Бликсен (1885–1962), писатель
• Мануэль Мария Барбоза дю Бокаж (1765–1805), поэт †
• Наполеон Бонапарт (1769–1821), император Франции S
• Антониу Ботто (1897–1959), поэт
• Камило Каштелу Бранко (1825–1890), писатель
• Бо Браммелл (1778–1840), модный арбитр
• Аль Капоне (1899–1947), гангстер †
• Генри Стюарт (1545–1567), второй муж Марии Королевы Шотландии
• Фредерик Делиус (1862–1934), композитор †
• Гаэтано Доницетти (1797–1848), композитор
• Бедржих Сметана (1824–1884), композитор †
• Поль Гоген (1848–1903), художник †
• Генрих Гейне (1797–1856), поэт †
• Генрих VIII (1491–1547), король Англии S
• Иван Грозный (1530–1584), царь России
• Скотт Джоплин (1867 / 8–1917), композитор †
• Джон Китс (1795–1821), поэт S
• Уильям Лобб (1809–1864), коллекционер растений S
• Эдуард Мане (1832–1883), художник †
• Ги де Мопассан (1850–1893), писатель †
• Фридрих Ницше (1844–1900), философ S
• Джек Пикфорд (1896–1933), актер †
• Мартин Алонсо Пинзон (1441–1493) капитан «Пинты» †
• Лев Толстой (1828–1910), писатель С
• Тео Ван Гог (1857–1891), торговец произведениями искусства †
• Винсент Ван Гог (1853–1890), художник S
• Оскар Уайльд (1854–1900), писатель S
• Евгений Сандов (1867–1925), культурист S
• Франц Шуберт (1797–1828), композитор S
• Анри де Тулуз-Лотрек (1864–1901), художник †
• Джон Уилмот (1647–1680), писатель †
• Хьюго Вольф (1860–1903), композитор †
• Михаил Врубель (1856–1910), художник
• Костас Кариотакис (1896–1928), греческий поэт
• Лорд Рэндольф Черчилль (1849–1895), британский политик, отец Уинстона Черчилля
• Гарри Нельсон Пиллсбери (1872–1906), шахматный мастер †
• Адольф Гитлер (1889–1945), политик S
• Элеонора Толедская (1522-1562), герцогиня Флорентийская S

Дополнительная литература